被大公司纷纷看好的DuoBody platform，到底是什么？_医药

2016

09/21

15:58

生物制药小编

作者：alpharesearcher

医药

今年8月，Gilead与Genmab达成了合作协议，将向Genmab公司支付最高超过3亿美元的费用（包括500万美元预付款以及2.77亿美元里程碑付款），利用后者的DuoBody平台开发治疗HIV的双特异性抗体药物。

此举让这家来自丹麦的生物技术公司，再次走进了大众的视野。早在几年前，杨森便与Genmab达成了合作，基于其DuoBody平台开发多款双特异性抗体。

这个被大公司纷纷看好的DuoBody platform，到底是什么？

DuoBody Platform简介

双特异性抗体（bispecific antibody, BsAb），与普通抗体相比具有更强特异性和杀伤效应，另外还有具有降低耐药性，应用到免疫疗法等显着优势。对于双特异性抗体的技术平台以及格局armstrong在114个在研双特异性抗体药物统计一文中有了详尽的介绍，这里不加赘述。

DuoBody platform是其中的一种双特异性抗体生成技术平台，能够快速、稳定以及规模化生产的双特异性抗体。

DuoBody platform操作相对简单，仅需在两个IgG1抗体的Fc CH3区域分别引入K409R和F405L突变位点，混合两个目标抗体在氧化还原的环境下即可完成Fab-arm交换，形成双特异性抗体。

Duobody灵感来源与原理

人体的IgG可分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4四种亚型，IgG4约占5%，具有独特生物学特性。Van der Neut Kolfschoten等人证实IgG4可在体内动态的进行重链交换，又称 Fab臂交换（Fab-arm exchange，FAE），可导致形成半抗体分子或者两个半抗体分子进一步形成双特异性抗体。

在体外环境中，Fab臂交换也可以在添加如GSH等还原剂的情况下模拟出。那么是否可以根据天然中存在的Fab臂交换这一现象，用于工程化双特异性抗体的开发呢？

基于IgG4这种Fab-arm交换的特性进行双特异性抗体开发，称为cFAE（ controlledFab-arm exchange），DuoBody技术平台的核心便是cFAE。

研究显示，IgG4铰链区228位的丝氨酸（S228）以及CH3区409位的精氨酸（R409）对于Fab-arm交换过程起着关键的作用，这两个位点的突变都能够阻碍Fab-arm交换过程的发生。

非共价CH3区之间的解离是FAE过程的关键限速步骤，IgG4的R409残基会降低CH3-CH3之间的作用力。将IgG1409位的赖氨酸（ K）突变成为精氨酸（ K409R），赋予了IgG1FAE的能力，同时也保留了IgG1的ADCC以及CDC能力。

筛选另外一个抗体CH3区域相应的突变位点（L368，K370，D399，F405，Y407），表明IgG1-K409R 和IgG1-F405L 这种组合能够降低Fab-arm交换过程中同源二聚体的形成，提高异源二聚体化效率以及阻止Fab-arm交换完成后的解离和再交换，异源二聚体纯度可达到95%以上。