SAT:一种新的分子诊断技术

医疗器械 来源:互联网
2015
10/14
11:17
互联网 医疗器械

背景简介

随着分子生物学研究的进展,越来越多的新技术被开发和应用到核酸检测领域。除PCR技术之外,TMA技术(Transcription mediated amplification)、NASBA技术(nucleic acid sequence-based amplification)、b-DNA技术、LCR技术(ligase chain reaction)以及SDA技术(strand displacement amplification)等都已经在一些特定的病原体检测上得到应用,并显示出良好的特性【1】。

SAT技术(Simultaneous Amplification and Testing)是基于TMA恒温扩增技术发展起来的一项最新核酸检测技术,是国内企业自主研发的专利技术,国外同类技术主GEN-PROBE的TMA技术(转录介导的核酸扩增技术)和法国BIOMERIEUX的NASBA技术(基于核酸序列扩增检测技术)已在美国、欧洲、大洋洲、东南亚的血筛、感染性疾病检测(如沙眼衣原体、淋球菌等)领域普遍应用,国内部分血站的核酸检测也已使用TMA技术。

技术原理

带有T7启动子的引物与靶标RNA结合,开始逆转录合成cDNA;在M-MLV RT酶的RNase H活性作用下靶标RNA链降解,形成单链cDNA;之后反向引物与cDNA结合,在M-MLV RT酶的聚合酶活性作用下产生靶标核酸(RNA)的一个双链DNA拷贝,且该双链带有T7启动子。在T7 RNA聚合酶的作用下,一条DNA双链上产生多个(100~1000个)RNA拷贝;每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环;同时,带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合,产生荧光。该荧光信号可由荧光检测仪器实时捕获,直观反映扩增循环情况,整个扩增过程都在同一温度(42°C)下进行。

下表列出了SAT同目前常见的其他几种核酸扩增检测技术在检测靶标、酶、反应条件、扩增产物及仪器设备等方面的比较:

SAT与各种核酸扩增检测技术对比表


技术特点

◆ 恒温扩增

恒温扩增不需要繁琐的升降温步骤,一方面可以降低对仪器的要求,降低试验成本;另一方面也能够使SAT反应体系不受样品中DNA、肝素、血红蛋白、EDTA、脂质等污染因子的影响,提高检测稳定性和结果准确性;同时,由于没有高温步骤,也可以在一定程度上降低污染。

◆ RNA检测 -- 降低污染风险

起始靶标与扩增产物均为RNA,从RNA到RNA的循环扩增过程,由于RNA在环境中极易降解,可有效避免扩增产物的污染,降低核酸扩增实验室的要求。

◆ 更高的扩增效率 -- 更高灵敏度

SAT技术的扩增效率极高,每一个循环可以扩增100~1000倍的模版,扩增效率为(100~1000)n,15~30分钟即可将模板扩增109倍,检测灵敏度远高于其它核酸检测技术,有效防止假阳性结果……在血液筛查领域,灵敏度优势更显得意义重大。同为恒温扩增技术的TMA技术在欧美有很好的应用证明【2】【3】。

◆ 高特异性

针对靶标核酸特异设计的引物和分子信标,实现特异性的扩增和检测,有效防止假阴性结果。

应用前景

SAT检测的靶标核酸是RNA,而RNA在病原体外的环境中易降解,检测结果可作为区分死菌、活菌的依据,因此更利于用药之后疗效的监测和判愈。

SAT技术的高灵敏度、高特异性则可以最大程度地确保检测结果的高度准确,高度可靠,有效避免假阳性、假阴性结果。

此外,由于SAT的恒温反应条件,可在一定程度上降低检测仪器的要求,利于更广泛的应用。

SAT技术作为一项新型的核酸检测技术,在一些领域具有明显的技术优势。该技术的广泛应用将会对临床病原体的检验诊断、进出口检验检疫、疾病的预防和控制以及传染性病毒的血液筛查等领域产生突破性的进展,是一项很有市场前景的新技术。

参考文献

【1】 Paul T Monis , Steven Giglio. Nucleic acid amplification-based techniques for pathogen detection and identification. Infection, Genetics and Evolution 6 (2006) 2-12.

【2】 Peter Lowe, Peter O'Loughlin, et al. Comparison of the Gen-Probe APTIMA Combo 2 Assay to the AMPLICOR CT/NG Assay for Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae in Urine Samples from Australian Men and Women. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, July 2006, p2619-2621

【3】 C. Giachetti, J. M. Linnen, et al. Highly Sensitive Multiplex Assay for Detection of Human Immunodeficiency Virus Type 1 and Hepatitis C Virus RNA. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, July 2002, p. 2408-2419

来源:互联网

为你推荐

全国预防接种日:“健康中国家,疫苗护万家”健康社区“免疫行动”促进计划启动资讯

全国预防接种日:“健康中国家,疫苗护万家”健康社区“免疫行动”促进计划启动

由新华网主办,中国医药卫生文化协会疫苗与健康分会、《中国社区医师》杂志联合支持的“健康中国家,疫苗护万家——健康社区‘免疫行动’促进计划”于4月23日在北京正式启动。

2025-04-24 14:07

第九十一批仿制药参比制剂目录资讯

第九十一批仿制药参比制剂目录

国家药品监督管理局发布仿制药参比制剂目录(第九十一批)。

2025-04-23 17:29

带状疱疹疫苗“遇冷”,百克生物2024年净利润腰斩资讯

带状疱疹疫苗“遇冷”,百克生物2024年净利润腰斩

近日,国内疫苗龙头企业百克生物发布2024年年报,数据显示,其报告期内实现营收12 29亿元,同比下降32 64%;归属于上市公司股东的净利润2 32亿元,同比下降53 67%。对于营收...

2025-04-23 12:59

国家药监局 海关总署允许进口牛黄试点用于中成药生产资讯

国家药监局 海关总署允许进口牛黄试点用于中成药生产

试点区域为北京、天津、河北、上海、浙江、江西、山东、湖南、广东、四川、福建、广西等12省(自治区、直辖市)。

2025-04-22 18:48

专注心衰管理,合源医疗完成超亿元融资资讯

专注心衰管理,合源医疗完成超亿元融资

三类有源植入产品

2025-04-22 13:17

欧狄沃®在中国获批可切除非小细胞肺癌围术期适应症资讯

欧狄沃®在中国获批可切除非小细胞肺癌围术期适应症

持续丰富早期癌症临床选择

2025-04-22 11:12

从“不患病”到“活得好”!多方联动助力帕金森病全程管理资讯

从“不患病”到“活得好”!多方联动助力帕金森病全程管理

2025年4月11日是第29个“世界帕金森病日”,今年帕金森病日的主题是“人工智能助力帕金森病全程管理”。

2025-04-22 10:59

又一家A股上市药企,退市已定资讯

又一家A股上市药企,退市已定

一直悬在海南普利制药头上的“达摩克利斯之剑”最终还是落下来了。

2025-04-22 09:45

重庆常用药联盟接续集采中选结果资讯

重庆常用药联盟接续集采中选结果

近日,重庆常用药联盟接续集采中选情况公布,该联盟由重庆牵头,联合湖北、广西、海南、贵州、云南、青海、宁夏、新疆及新疆生产建设兵团等十省(区、市)开展的药品集中带量采...

2025-04-21 18:48

降低20%主要心血管不良事件发生风险,诺和盈中国说明书更新资讯

降低20%主要心血管不良事件发生风险,诺和盈中国说明书更新

4月21日,中国国家药品监督管理局(NMPA)批准更新诺和盈®(司美格鲁肽2 4mg)的说明书。

2025-04-21 16:02

全周期智控慢病,诺和诺德与京东健康开启战略合作资讯

全周期智控慢病,诺和诺德与京东健康开启战略合作

2025年4月21日,全球领先的生物制药公司诺和诺德与京东健康在北京正式签署战略合作协议,标志着双方在糖尿病和体重管理领域的合作进入新阶段。依托诺和诺德百年深耕慢病领域的专...

2025-04-21 15:57

康方生物1类新药依若奇单抗上市申请获批,用于中重度斑块状银屑病成人患者资讯

康方生物1类新药依若奇单抗上市申请获批,用于中重度斑块状银屑病成人患者

该药是我国第一个且唯一获批上市的IL-12 IL-23“双靶向”单克隆抗体新药,是康方生物自身免疫性疾病领域首个获批上市的一类新药。

2025-04-21 13:39

阿斯利康乳腺癌1类创新药卡匹色替片中国获批资讯

阿斯利康乳腺癌1类创新药卡匹色替片中国获批

该药适用于联合氟维司群用于转移性阶段至少接受过一种内分泌治疗后疾病进展,或在辅助治疗期间或完成辅助治疗后12个月内复发的激素受体(HR)阳性、人表皮生长因子受体2(HER2)...

2025-04-21 11:02

辉瑞宣布终止一款口服GLP-1减肥药的临床开发资讯

辉瑞宣布终止一款口服GLP-1减肥药的临床开发

近日,辉瑞在其官网宣布,决定终止开发口服胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)激动剂Danuglipron(PF-06882961),原因系在一项有关用药剂量的临床试验中,一名患者出现了可能由该...

2025-04-21 10:29

福建省医保局印发单列门诊统筹支付医保药品目录(2024年版)资讯

福建省医保局印发单列门诊统筹支付医保药品目录(2024年版)

根据2024年6月发布的《福建省医保药品单列门诊统筹支付管理办法(试行)》,为了让参保患者无需住院、在门诊就医也能用上国家谈判药品、享受医保待遇,将适用于门诊治疗、使用周...

2025-04-20 13:34

首批中国消费名品名单,医药健康企业有哪些?资讯

首批中国消费名品名单,医药健康企业有哪些?

近日,工业和信息化部办公厅发布首批中国消费名品名单,分为中国消费名品名单和中国消费名品成长企业名单。首批中国消费名品名单共包括93个企业品牌和43个区域品牌。中国消费名...

2025-04-20 11:17

携手共绘“个性化近视手术”新蓝图:爱尔眼科与爱尔康启动100家医院全光塑技术战略合作资讯

携手共绘“个性化近视手术”新蓝图:爱尔眼科与爱尔康启动100家医院全光塑技术战略合作

双方将以技术共享为核心,以人才培养为支撑,以科研协作为纽带,全力推进屈光手术标准化诊疗体系建设,加速前沿技术在临床领域的普及应用

文/ 屈慧莹 2025-04-19 23:35

CDE:简化港澳已上市传统口服中成药内地上市注册审批申报资料及技术要求资讯

CDE:简化港澳已上市传统口服中成药内地上市注册审批申报资料及技术要求

允许香港、澳门特区本地登记的生产企业持有,并经香港、澳门特区药品监督管理部门批准上市且在香港、澳门特区使用15年以上,生产过程符合药品生产质量管理规范(GMP)要求的传统...

2025-04-18 18:54