据最新一期《分子系统生物学》报道,加拿大研究人员开发出一种新技术,可将DNA(脱氧核糖核酸)条形码拼接在单个细胞内,以同时搜索数以百万计蛋白质对之间的相互作用。
近年来,DNA条形码技术使科学家开展高并行试验(许多不同类型的细胞在同一试管内进行试验)成为可能,而新一代DNA测序技术的发展,进一步提高了对条形码计数和读取结果的效率。
然而,可在同一试管内进行的试验次数,却受限于编码的细胞类型数量。一直以来,DNA条形码都是一维的,也就是一个条形码只能做一次试验。允许条形码在细胞内融合在一起,意味着科学家们现在可以打破这一障碍。新技术可显着提高在单一试管内进行的实验次数,在同等成本条件下能将效率提高10倍。
在广泛使用的酵母双杂交(Y2H)方法中,携带一个“诱饵”蛋白的酵母细胞与携带一个“猎物”蛋白的酵母细胞配对。对Y2H系统进行操纵后,只有“诱饵”与“猎物”蛋白黏在一起的细胞才能存活,从而使科学家可以观察到哪些蛋白间互相关联。在被命名为“条形码融合遗传学—酵母双杂交(BFG-Y2H)”的新技术中,携带着数千“诱饵”和“猎物”蛋白的细胞在同一培养皿中配对。
BFG-Y2H方法的新颖之处在于,通过对细胞编程,将来自“诱饵”和“猎物”细胞的DNA条形码连接在一起,形成一个“融合条形码”,然后利用新一代DNA测序方法对融合条形码进行检测。
研究人员称,这项研究的最终目标,是建立蛋白相互作用网络的三维视图,而不是静态图。通过有效建立含有更丰富信息的蛋白相互作用图谱,BFG-Y2H方法可拓展研究人员对细胞工作机理的理解,并展现只在某种特定环境条件下才能发生的蛋白相互作用,从而加速对基因功能和人类疾病的理解。
有一种条码,并不是印在物品上,而是存在于动植物DNA中,这就是“生命的条形码”。DNA条形码为现代生物学提供了丰富的分子信息,对鉴定物种及物种间亲缘关系等研究意义重大。不过,此前的实验效率仍然受细胞类型的限制,现在新融合技术的出现,让研究人员在一个试管内,可以并行检测到数百万个蛋白质配对,换句话说,它的出现更高效定位了蛋白质的相互作用。
来源:科技日报
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